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MDA-MB-468(乳腺癌細(xì)胞)細(xì)胞計(jì)數(shù)

發(fā)表時(shí)間:2020-12-11

MDA-MB-468(乳腺癌細(xì)胞)細(xì)胞計(jì)數(shù):

1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。

2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。

3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/p>

4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。

5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度:

(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104

說(shuō)明:公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。

公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。

公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:

1.0mm(長(zhǎng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3

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