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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3357
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-06-03
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3357 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Bovine Papillomavirus(BoPV) | LZR3357 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
宋氏志賀氏菌sFLT-1(Receptor for Vascular Endothelial cell Growth Factor VEGF) ELISA KIT拉丁屬名: Shigella sonnei
恥垢分枝桿菌PSMA(Prostate specific membrane antigen) ELISA KIT拉丁屬名: Mycobacterium smegmatis
深綠木霉SORT1(Sortilin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma atroviride
大腸埃希菌NID2 (Nidogen 2) ELISA Kit拉丁屬名: coli
米曲霉ICA(islet cell antibody)ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素D型Peth(Phosphatidylethanol)ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type D
薄邊蜂窩孔菌MAC (Membrane Attack Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Hexagonia tenuis
黑曲霉25(OH)D(25-Hydroxy Vitamin D) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
銅綠假單胞菌HPF4(Heparin/Platelet Factor 4 Antibodies)ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
果生鏈核盤菌GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
四川散斑殼IMA(Ischemia Modified Albumin)ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
針層孔菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
擬可可毛球二孢ACV-A (Activin A) ELISA Kit拉丁屬名: Lasiodiplodia pseudotheobromae
乳酸乳球菌乳脂亞種ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. cremoris
釀酒酵母ANG3 (Angiopoietin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
牛病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)石斛酚Phenol,4-[2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)ethyl]-2,6-dimethoxy-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H20O5 分 子 量: 304.3377
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 尿激酶型纖溶酶原激活因子（多肽）雙縮脲試劑(AB液)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原莽草酸3,4,5-Trihydroxycyclohex-1-enecarboxylic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H10O5 分 子 量: 174.1513
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白垂盆鈔草甙(治肝炎藥)，垂盆草甙2-Butenenitrile, 4-(b-D-glucopyranosyloxy)-2-(hydroxymethyl)-,(2E)-對(duì)照藥材 分 子 式: C11H17NO7 分 子 量: 275.25518
Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 蛋白1抗原脫氧膽酸鈉溶液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 蛋白2抗體甘油三油酸酯triolein中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C57H104O6 分 子 量: 885.44
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷酸化蛋白激酶B抗原（絲氨酸磷酸化位點(diǎn)：473）臺(tái)灣三尖杉?jí)Awilsonine對(duì)照藥材 分 子 式: C20H25NO4 分 子 量: 343.4168
