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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
鴨肝炎病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3520
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-26
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3520
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鴨肝炎病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Duck Hepatitis Virus(DHV)

LZR3520

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

豇豆慢生根瘤菌CYP7A1 (Cytochrome P450 7A1) ELISA Kit 用途: 與豇豆共生固氮良好。

布蘭克假絲酵母C/EBPα (CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida blankii

巨大芽孢桿菌PPARγC1α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  megaterium

金龜子綠僵菌ADCY3 (Adenylate Cyclase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae

蘇云金芽孢桿菌溫泉亞種PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. wenquanensis

黑曲霉MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger van Tieghem

Rhizobium alkalisoliCAM-Ab (Anti-Calmodulin Specific Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

游動球菌MN (Metanephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Planococcus sp.

乳酸乳球菌FTL (Ferritin, Light Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactococcus  lactis

球孢白僵菌H-Cadherin (Cadherin, Heart) ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究

釀酒酵母OLAb (Anti-Oxidized Low Density Lipoprotein Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

灰色鏈霉菌灰色亞種LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces griseus subsp. griseus

孟氏假單胞菌PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

栗酒裂殖酵母OTF2A (Octamer Transcription Factor 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe

血芝PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Ganoderma formosanum T. T. Chang & T. Chen
鴨肝炎病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商KAT13D/CLOCK  生物鐘KAT13D蛋白抗體葉含乙酰癭花香茶菜素 BKaur-16-en-15-one,11,18-bis(acetyloxy)-7,13-dihydroxy-, (4a,7a,11b)- (9CI)對照藥材 分 子 式: C24H34O7 分 子 量:

Rex1/Zinc finger protein 754  鋅指蛋白754抗體TLE溶液(pH8.2)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PIWIL3  piwi樣3蛋白抗體匙羹藤酸Ib-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,4a,16b,21b,22a)-28-(acetyloxy)-16,22,23-trihydroxy-21-[[(2E)-2-methyl-1-oxo-2-buten-1-yl]oxy]olean-12-en-3-yl中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C43H66O14 分 子 量: 806.975740000001

VGF/Nerve growth factor inducible  神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白抗體泡桐素1H,3H-Furo[3,4-c]furan-3a(4H)-ol,1,4-bis(1,3-benzodioxol-5-yl)dihydro-, (1S,3aS,4R,6aR)-對照藥材 分 子 式: C20H18O7 分 子 量: 370.35272

pan methyl Lysine  泛甲基賴氨酸抗體青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

DAP1  死亡相關(guān)蛋白1抗體巴利森苷E化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

Adenylosuccinate Lyase  腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體異阿魏酸乙酯(E)-Ethyl 3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)acrylate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H14O4 分 子 量: 222.23716


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