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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3590
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-05-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3590 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Escherichia spp. | LZR3590 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Fusarium venenatum NirenbergBF (Factor B) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium venenatum Nirenberg
短小芽孢桿菌PA2G4 (Proliferation Associated Protein 2G4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
草木樨中華根瘤菌TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit用途: 固氮
光滑青霉3-NT (3-Nitrotyrosine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium glabrum
蜂房哈夫尼菌CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豌豆根瘤菌GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit用途: 共生固氮
香菇EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
孟氏假單胞菌BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
麥根腐平臍蠕孢MASP (Mannan Binding Lectin Associated Serine Protease) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
灰葡萄孢菌*fMet (Formylmethionine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
克魯斯假絲酵母SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida krusei
桑炭疽刺盤菌RNASE (Ribonuclease) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
乳酸乳球菌乳亞種ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
粉擬青霉UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格IFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體（神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4）正丁基苯酞;丁基酞內(nèi)酯Butylphthalide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H14O2 分 子 量: 190.23836
PERP/p53 apoptosis effector related to PMP22 p53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體新芒果苷Neomangiferin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H28O16 分 子 量: 584.48022
phospho-GATA-4(ser 262) 磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體動物灌注液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體安石榴甙Punicalagin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H28O30 分 子 量: 1084.72
SCN3B 電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體11-去氧澤瀉醇B11-Deoxyalisol B化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.7
TIS11D/ERF2 表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體獐牙菜苷Sweroside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H22O9 分 子 量: 358.34
xCT/CCBR1 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體氯化鈉溶液(1mol/L,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
